单精子注射的操作过程

胞浆内单精子注射：即将一个精子通过透明带及卵细胞膜注入卵子的胞浆内，谓之胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection，ICSI)在梗阻性无精症可用附睾抽吸术或活检获得精子。包括的步骤有：

A.精液先用Percoll梯度分离液处理再加以代谢刺激物，用含卵泡液的培养液培养。

B.采卵后1小时用HEPES缓冲Earle's培养液，内含160～180IU/ml的透明质酸酶培养1分钟以去除周围的卵冠丘细胞，玻璃细管吹吸完全去除这些细胞。

先吸入一个近不活动的精子，并使尾部首先进人吸管。卵母细胞被另一侧的固定吸管吸住。然后将显微注射吸管刺入透明带。SUZI中一般将3个精子注入卵黄间周间隙，ICSI中使卵母细胞的体位于12或6点钟处，在3点钟处显微注射吸管进入卵子的细胞浆，1.2(Picoliter)培养液中的一个精子注入，注射吸管缓缓退出，固定吸管放开卵母细胞，所有操作都在恒温平台上。